“为何先进的查无异常基因检测仍找不出病因？”临床实践中，医生可能会遭遇到患者或家属发出的从到测何这类质疑 。特别是精准基因结局当部分患者的基因检测报告可能显示“阴性”结果 ，或检测结果难以完全解释患者临床症状时 ，诊断组暗诊疗质疑声会越发高涨。区变这类患者的异检暗区pc准星设置病因，可能与基因组中一个长期以来研究相对有限的改写基因组“暗区”——非编码区有关。

如果基因是查无异常一本书 ，外显子就是从到测何书中直接传达故事情节的文字，而非编码区则是精准基因结局段落间的空白。传统观念认为，诊断组暗诊疗只有“文字”才承载信息。区变然而 ，异检现代遗传学发现，改写这些“空白”区域同样藏着关键指令 ，查无异常一旦出错也会导致疾病发生
。

人类非编码基因组中的crossingpro准星功能元件[1]

被忽视的基因组“暗区”：

非编码区

在人类基因组中，编码蛋白质的外显子区域仅占约2%，而非编码区域占据了98%。20世纪末至21世纪初，部分研究曾将非编码区称为“垃圾DNA”，但实际情况并非如此。

非编码区主要包括内含子 、调控元件（如启动子、增强子）  、暗区准星非编码RNA基因及染色体结构区域（如端粒、着丝粒）等 。在遗传病致病变异研究中 ，除经典的外显子变异及近剪接位点变异（指距离外显子-内含子边界±2bp内的变异）外 ，越来越多研究发现了致病的深度内含子变异（指距离剪接位点50个碱基以上的DNA序列改变）。这类变异可能通过多种机制致病 ：

►创造新的剪接位点 ，导致异常“假外显子”插入成熟mRNA；

►破坏正常的剪接增强子或沉默子；

►影响基因的调控元件；

►改变非编码RNA的功能。

典型案例：

破解苯丙酮尿症家庭的准星大师(免费)“第二变异”之谜

一对夫妇曾生育一个苯丙酮尿症患儿（现年7岁） 。该患儿既往在外院经全外显子组测序（WES），仅检出母源性致病变异（位于PAH基因11号外显子区域），但始终未能明确第二致病等位基因 。

为了评估家族再生育风险，患者接受了迪安诊断增强型全外显子组测序技术（扩展覆盖深度内含子区域）复测 。除了再次确认患儿携带母源PAH基因11号外显子区域的致病性杂合变异以外，突破性检出了父源性深度内含子变异（位于PAH基因10号内含子区域），明确了该患儿病因 ，十字准星为夫妇再生育提供精准遗传咨询指导。

全外显子组测序技术（扩展覆盖深度内含子区域）

检测结果

传统检测的盲区：

为什么WES或靶向基因Panel

会遗漏这些变异
？

临床常用的全外显子组测序 (WES) 或者靶向基因Panel，主要针对外显子编码区域设计 ，其技术原理决定了它在检测非编码区变异方面存在天然局限：

#

捕获探针覆盖不足

常规WES探针主要靶向外显子编码区及邻近剪接位点，对深度内含子区域、启动子、增强子等非编码区域捕获效率极低  。

# 同聚物区域测序偏差

如腺嘌呤、准星怪兽2.0下载鸟嘌呤等连续重复的同聚物区域易出现测序错误
。

#

大片段缺失/插入的断点常位于非编码区，WES因短读长特性无法跨越断点区域 ，难以精确定位。

#

注释信息缺乏

现有数据库中收录的变异，集中于编码区
，对非编码区变异的功能注释不足 ，限制了非编码区致病变异的准心大师2.0解读。

如何照亮基因组“暗区”
？

面对非编码区致病变异对临床诊断带来的挑战 ，我们可以采取多层次的解决方案 ：

1

扩展捕获探针

在WES检测探针中针对性补充已知致病非编码区的捕获探针
，提升基因组“暗区”变异的检出率 。

2

RNA-seq补充

RNA-seq需结合DNA测序结果 ，重点分析异常剪接事件或差异表达基因。

3

WGS策略

对临床高度怀疑单基因病 ，但WES检测结果为阴性的患者，可补充全基因组测序 (WGS) 策略
。暗区突围辅助网

4

功能验证

对WES或WGS检出的可能影响剪接的变异，可进行minigene剪接实验等功能实验验证。

随着基因组学技术的进步 ，我们正逐步揭开基因组“暗区”的神秘面纱。非编码区不再是理论上的概念
，而是具有实实在在临床诊断价值的区域。对这些区域的拓展检测
，可能是暗区突围十字准星下载解开疑难病例诊断之谜的关键密码，将为疑难未确诊患者带来新的希望。

迪安诊断采用创新性的探针设计思路，将非编码区已知致病性变异补充进多项遗传病检测探针中，助力遗传病的精准诊断和个性化健康管理。

迪安诊断涉及非编码区致病变异的检测项目

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